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A.微生物限度檢測儀定義:
微生物限度檢測儀檢查法:微生物限度檢查法系檢查非規定滅菌制劑及其原料、輔料受微生物污染程度的方法。
B.微生物限度檢測儀實驗用具:
電熱恒溫培養箱、電熱恒溫水溫箱、試管、刻度吸管、量筒、三角瓶、培養皿、試管架、注射器、針頭、注射器盒、研缽、75%酒精棉球、紫外燈(365nm波長)。
1. 培養基:
2. 營養瓊脂培養基、玫瑰紅鈉瓊脂培養基、膽鹽乳糖培養基、麥康凱瓊脂培養基、枸櫞酸鹽培養基、磷酸鹽葡萄糖胨水培養基、蛋白胨水培養基、4-甲基傘形酮葡萄糖苷酸(MUG)培養基。
3. 培養基的管理、配置應符合檢定菌、培養基管理規程、培養基配置規程。
4. 試液:甲基紅試液、а-奈酚乙醇試液、40%氫氧化鉀溶液、靛基質試液。
5. 稀釋劑:0.9%無菌氯化鈉溶液、PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液。
6. 供試品溶液的制備:取供試品(供試品如為固體,置研缽中研磨成細粉)放入試管中,加入適量的稀釋劑制成1:10濃度的供試品溶液。
7. 對照用菌液:控制菌檢查均應作相應已知菌的對照試驗,對照菌株為大腸桿菌[CMCC(B)44102]。
C.微生物限度檢測儀檢查法:
微生物限度檢測儀除另有規定外,細菌的培養溫度為30-35℃,霉菌的培養溫度為23-28℃,控制菌的培養溫度為35-37℃。
1. 細菌、霉菌計數:
2. 平皿法
采用平皿法進行菌數測定時,應取適宜的連續2~3個稀釋級的供試液。
取供試液1ml,置直徑90mm的無菌平皿中,注入15~20ml溫度不超過45℃的溶化的營養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基,混勻,凝固,倒置培養。每稀釋級每種培養基至少制備2個平板。
陰性對照試驗 取試驗用的稀釋液1ml,置無菌平皿中,注入培養基,凝固,倒置培養。每種計數用的培養基各制備2個平板,平均不得有菌生長。
3. 培養和計數 除另有規定外,細菌培養48小時,逐日點計菌落數,一般以48小時的菌落數報告;霉菌、酵母菌培養72小時,逐日點計菌落數,一般以72小時的菌落數報告;必要時,可適當延長培養時間至5~7天進行菌落計數并報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數。點計算各稀釋級供試液的平均菌落數,按菌數報告規則報告菌數。若同稀釋級兩個平板的菌落平均數不小于15,則兩個平板的菌落數不能相差1倍或以上。
微生物限度檢測儀檢查法:微生物限度檢查法系檢查非規定滅菌制劑及其原料、輔料受微生物污染程度的方法。
B.微生物限度檢測儀實驗用具:
電熱恒溫培養箱、電熱恒溫水溫箱、試管、刻度吸管、量筒、三角瓶、培養皿、試管架、注射器、針頭、注射器盒、研缽、75%酒精棉球、紫外燈(365nm波長)。
1. 培養基:
2. 營養瓊脂培養基、玫瑰紅鈉瓊脂培養基、膽鹽乳糖培養基、麥康凱瓊脂培養基、枸櫞酸鹽培養基、磷酸鹽葡萄糖胨水培養基、蛋白胨水培養基、4-甲基傘形酮葡萄糖苷酸(MUG)培養基。
3. 培養基的管理、配置應符合檢定菌、培養基管理規程、培養基配置規程。
4. 試液:甲基紅試液、а-奈酚乙醇試液、40%氫氧化鉀溶液、靛基質試液。
5. 稀釋劑:0.9%無菌氯化鈉溶液、PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液。
6. 供試品溶液的制備:取供試品(供試品如為固體,置研缽中研磨成細粉)放入試管中,加入適量的稀釋劑制成1:10濃度的供試品溶液。
7. 對照用菌液:控制菌檢查均應作相應已知菌的對照試驗,對照菌株為大腸桿菌[CMCC(B)44102]。
C.微生物限度檢測儀檢查法:
微生物限度檢測儀除另有規定外,細菌的培養溫度為30-35℃,霉菌的培養溫度為23-28℃,控制菌的培養溫度為35-37℃。
1. 細菌、霉菌計數:
2. 平皿法
采用平皿法進行菌數測定時,應取適宜的連續2~3個稀釋級的供試液。
取供試液1ml,置直徑90mm的無菌平皿中,注入15~20ml溫度不超過45℃的溶化的營養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基,混勻,凝固,倒置培養。每稀釋級每種培養基至少制備2個平板。
陰性對照試驗 取試驗用的稀釋液1ml,置無菌平皿中,注入培養基,凝固,倒置培養。每種計數用的培養基各制備2個平板,平均不得有菌生長。
3. 培養和計數 除另有規定外,細菌培養48小時,逐日點計菌落數,一般以48小時的菌落數報告;霉菌、酵母菌培養72小時,逐日點計菌落數,一般以72小時的菌落數報告;必要時,可適當延長培養時間至5~7天進行菌落計數并報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數。點計算各稀釋級供試液的平均菌落數,按菌數報告規則報告菌數。若同稀釋級兩個平板的菌落平均數不小于15,則兩個平板的菌落數不能相差1倍或以上。